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一套成像系統(tǒng),既能提供大型樣品的光學(xué)切片,又幾乎無光毒性或光漂白性,同時還有極高的時間分辨率。
蔡司 Lightsheet Z.1 恰恰能實現(xiàn)這一切。獨一無二的多視角激光片層掃描顯微成像系統(tǒng)(Light Sheet Microscopy)能夠記錄大型活體樣品的發(fā)育過程,對樣品低損傷地成像,提供更多的信息。
成像速度極快:Lightsheet Z.1 是一款能以極快速度獲取光學(xué)切片的顯微工具,可讓您以亞細胞分辨率獲得完整的樣品圖像,耗時卻遠少于采用其它技術(shù)所需的時間。
組織透明處理技術(shù)能夠讓您深入大型生物樣品內(nèi),例如:組織切片、大腦、胚胎、器官球狀體或活組織切片。您可以使用增強的光學(xué)穿透深度來捕獲整個器官的熒光信號。這也令其成為一項具有發(fā)展前景的技術(shù),例如:檢測小鼠大腦神經(jīng)元網(wǎng)絡(luò)。
Lightsheet Z.1 結(jié)合了光透技術(shù)與激光片層掃描顯微技術(shù)兩者的優(yōu)勢。它允許您借助出色的光效能和速度對經(jīng)組織透明液處理的大型樣品成像,無任何光毒性。您現(xiàn)在可以利用數(shù)千幅高質(zhì)量圖像來獲取多區(qū)塊 Z 軸層疊圖像。成像速度通常為每秒 10 至 40 幀,成像時間從數(shù)小時縮短至數(shù)分鐘。
使用配有 LD Plan-Apochromat 20x/1.0 物鏡的 Lightsheet Z.1 顯微鏡,在經(jīng)折射率 n=1.38 的 Scale 介質(zhì)(Hama 等,Nat Neurosci 期刊,2011 年)進行透明處理的組織上來完成實驗。如果水性澄清介質(zhì)的折射率為 n=1.45,那么您可以選擇 Lightsheet Z.1 成像物鏡 20x/1.0(選用 CelExplorer Labs 公司生產(chǎn)的 FocusClear? 澄清液(Chung 等,Nature 期刊,2013 年)處理最佳,http://www.celexplorer.com) 或 Lightsheet Z.1 成像物鏡 5x/0.16 檢測樣品。
樣品夾配有易于使用的接口,能靈活地調(diào)整樣品擺放,以滿足您的特定需求。各種不同的適配器能幫助您從底部或采用頂部懸掛的方式來放置樣品:自由選擇最佳觀察角度。
Lightsheet Z.1 是觀察活體樣品發(fā)育的一種對樣品損傷最低的方法,它開啟了研究新紀(jì)元。
以下為激光片層掃描顯微技術(shù)(Light Sheet Fluorescence Microscopy)的應(yīng)用:
在斑馬魚和黑腹果蠅等模式生物胚胎形成階段,對細胞進行時間、空間模式的熒光成像。
胚胎與小型生物中細胞動態(tài)過程的快速成像,例如:細胞遷移、心臟發(fā)育、血流、血管發(fā)育、神經(jīng)發(fā)育及鈣成像。
三維細胞培養(yǎng)、球體和囊腫、組織培養(yǎng)、器官培養(yǎng)的實時成像。如細胞遷移、表達模式及細胞增殖的分析。
對熒光標(biāo)記的固定樣品(組織切片、小鼠大腦、胚胎、器官、球狀體和活組織切片)成像,采用折射率 n=1.38 或 n= 1.45 的水性透明介質(zhì)對樣品進行光透處理。選用 Scale A2,n=1.38,(Hama 等,Nat Neurosci 期刊,2011 年)或 FocusClear? (CelExplorer Labs 公司,http://www.celexplorer.com)澄清液,n=1.45(Chung 等,Nature 期刊,2013 年)處理最佳。
觀察敏感的發(fā)育過程和執(zhí)行生理測量。
使用 Lightsheet Z.1 對海洋生物進行熒光成像,例如:海鞘、魷魚、浮游生物及扁形蟲。
固定和活體樣品的精細三維結(jié)構(gòu)成像,例如:斑馬魚和青鳉魚。
激光片層掃描顯微技術(shù) LSFM 將熒光激發(fā)與檢測分割成兩個獨立的光路,檢測軸線與光照軸線垂直。也就是說,您可以對樣品內(nèi)部的單一層面實現(xiàn)照明,通過只激發(fā)這一層面的熒光,產(chǎn)生內(nèi)源性的光學(xué)切片。不需要針孔或者特殊的圖像處理。
來自于焦平面的熒光通過 CCD 成像,而不是像共聚焦或者其它激光掃描顯微鏡一樣,通過激光掃描逐點成像。與其它顯微鏡技術(shù)相比,基于 CCD 檢測器的并行圖像采集更快速,且所需的激發(fā)光強更小。
總而言之,LSFM 將光學(xué)切面效果與焦平面圖像的并行采集兩者結(jié)合。令三維成像極其快速,且大大提高了光效率。